Técnicas de coloração para detecção de Encephalitozoon cuniculi em cortes histológicos / Stain techniques for detection of Encephalitozoon cuniculi in tissue sections

No presente trabalho, foram avaliadas diferentes técnicas de coloração aplicadas a cortes histológicos para a identificação de Encephalitozoon cuniculi. Foram utilizados fragmentos hepáticos de camundongos Balb-c, imunossuprimidos com ciclofosfamida e inoculados com esporos de Encephalitozoon cuniculi. Os cortes histológicos incluídos em parafina foram corados pelas técnicas de hematoxilina-eosina (H-E), tricrômica modificada, Gram-Chromotrope, Giemsa, Brown-Hopps, PAS, Ziehl-Neelsen e Grocott, e ainda pela técnica de calcoflúor. As colorações azul de toluidina-fucsina e azul de toluidina foram utilizadas para os cortes incluídos em resina plástica. As técnicas de Gram-Chromotrope, Brown-Hopps e Ziehl-Neelsen foram as que permitiram melhor visualização dos esporos para o diagnóstico de E. cuniculi em cortes histológicos incluídos em parafina, uma vez que possibilitaram a clara diferenciação dos esporos de outras estruturas teciduais. Nos tecidos incluídos em resina plástica, as colorações de azul de toluidina-fucsina e azul de toluidina também facilitaram o encontro do agente. Por outro lado, a técnica tricrômica apresentou grande variabilidade nos resultados, sendo, portanto, pouco indicada para o diagnóstico em tecido. As demais técnicas - H-E, calcoflúor, Grocott, Giemsa e PAS - não permitiram a fácil identificação do E. cuniculi.

In this study, it was investigated different staining techniques applied to histological sections for identification of Encephalitozoon cuniculi. It was used liver fragments from Balb-c mice immunosuppressed with cyclophosphamide and inoculated with spores of Encephalitozoon cuniculi. The histological paraffin embedded sections were stained with hematoxylin-eosin (H-E), modified trichrome, Gram-Chromotrope, Giemsa, Brown-Hopps, PAS, Ziehl-Neelsen, and Grocott and also by the technique of calcofluor. Toluidine blue-fuchsin and toluidine blue stainings were used for the cuts embedded in plastic resin. Gram-Chromotrope, Brown-Hopps and Ziehl-Neelsen staining techniques permitted the best visualization of the spores for the diagnosis of E. cuniculi in histological paraffin embedded sections, since they allowed the clear differentiation of the spores among other tissue structures. In tissues embedded in plastic resin, toluidine blue-fuchsin and toluidine blue stainings also facilitate the finding of the agent. On the other hand, the trichrome technique showed great variability on results, therefore, allowing the identification of the parasite in tissue. The other techniques, H-E, calcofluor, Grocott, Giemsa and PAS did not permited the easy identification of the E. cuniculi spores.

Brief communication of the first two cases of Cyclospora in dogs, Sao Paulo, Brazil

Cyclospora cayetanensis é um coccideo que tem sido identificado em fezes diarreicas de indivíduos imunocompetentes e em pacientes com Aids. Os principais aspectos relacionados a sua epidemiologia e patogenia ainda näo estao bem elucidados, bem como a possibilidade da infecçäo humana por este protozoario ser uma zoonose. Neste trabalho, decrevemos os primeiros casos de identificaçäo de Cyclospora em caes. Nossos achados, embora preliminares, podem sugerir que alem de agua näo tratada, outras formas de transmissäo, assim como contato com cäes, possam ser importantes na doença diarreica humana associada com Cyclospora...

Cultivo da Entamoeba histolytica Schaudinn, 1903 a partir de amostras fecais / Cultivation of Entamoeba histolytica Schaudinn, 1903 from fecal samples

O presente trabalho teve como objetivo padronizar o isolamento e a manutenção de cepas de E. histolytica a partir de fezes humanas, para posteriores estudos. No período de agosto de 1989 a junho de 1990 foram estudadas 105 amostras fecais contendo cistos viáveis de E. histolytica. O isolamento e a manutenção das cepas foram realizados segundo a técnica descrita por Silva, com algumas modificações. Após a sedimentação espontânea das fezes pelo métod de Lutz, uma parte do sedimento foi semeada diretamente em meio de Pavlova modificado e outra, após tratamento prévio com HCl 0,5 N. As culturas foram mantidas com sucesso. Os autores discutem a metodologia empregada e concluem que as modificações introduzidas foram satisfatórias. Constataram também que Escherichia coli e Klebsiella sp presentes nos subcultivos favorecem o desenvolvimento do protozoário.

Ocorrencia do Criptosporium sp, em individuos com fezes diarreicas no municipio de Alfenas - MG / Occurrence of Cryptosporidium sp in individuals with diarrheic feces living in Alfenas - MG

No periodo de junho de 1991 a dezembro de 1992 foram examinadas 896 amostrasde fezes diarreicas de individuos imunocompetentes e imunocomprometidos, residentes no Municipio de Alfenas-MG. Em 25 individuos (2,80 porcento) foram detectados oocistos de Cryptosporidium sp, apos previa concentracao das amostras fecais pela tecnica do formol-eter e posterior coloracao pelas tecnicas da auramina fluorescente e Kinyoun mod. Observou-se maior frequencia de Cryptosporidium sp nos individuos de faixa etaria entre 0 a 6 anos, sendo que a maioria dos casos eram de residentes na area urbana. Nao foram verificados encontros concomitantes de outros protozoarios ou helmintos com o referido parasita nestes pacientes